毛桂莲^1,2* , 姚晓翠^1,2 , 杨迎月³ , 张虹^1,2 , 郑蕊^1,2 , 郑国琦¹

1 宁夏大学生命科学学院, 银川, 750021; 2 宁夏大学农学院, 宁夏优势特色作物现代分子育种重点实验室, 银川, 750021; 3 宁夏大学农学院, 银川, 750021
作者    通讯作者
《分子植物育种》印刷版, 2022 年, 第 20 卷, 第 16 篇   
收稿日期: 2020年12月16日    接受日期: 2020年12月25日    发表日期: 2022年08月02日

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为了了解液泡膜H⁺-ATPase 亚基的分子基础，揭示其在枸杞耐盐碱机制中的作用，本研究以宁夏枸杞为材料，采用 TA 克隆获得枸杞液泡膜H⁺-ATPase 亚基 E like (LbVHA-E like)的基因序列，采用实时荧光定量 PCR 的方法检测其在不同程度盐胁迫下的表达变化。研究结果显示：该基因全长 1 116 bp，开放阅读框为696 bp，编码 231 个氨基酸，预测分子量约为 26.42 kD，等电点 7.23；LbVHA-E like 进化关系上与茸毛烟草和番茄的亲缘关系最近。LbVHA-E like 蛋白质二级结构由 19.05%的随机卷曲、71.43%的 α- 螺旋和 6.93%的延伸主链构成，不存在信号肽、跨膜区，属于一种亲水的不稳定性蛋白，亚细胞定位预测其主要定位于细胞质。实时荧光定量 PCR 分析结果显示，在盐胁迫初期(1 d)，该基因在根和叶中的表达量均高于对照，在低浓度盐胁迫时(100 mmol/L)根中的基因表达量均高于对照，由此表明在盐胁迫初期，LbVHA-E like 基因可能参与了盐胁迫的Na⁺离子的排出和区隔化。本研究结果将为 LbVHA-E like 基因参与宁夏枸杞耐盐分子调控机理的揭示提供理论依据。

宁夏枸杞(Lycium barbarum)；液泡膜H+-ATPase 亚基 E like；基因克隆；RT-qPCR